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微生物培养基常见的灭菌方法

【打印页面】发布时间:2024-03-28 文章来源:洛肯
微生物菌种培养液是供微生物菌种生长发育、繁育、新陈代谢的混和养分。因为微生物菌种具备不一样的营养成分种类,对营养元素的规定也不尽相同,加上科学研究的目地不一样,因此培养液的类型许多,应用的原材料也都有差别,但从营养成分视角剖析,微生物菌种培养液中一般带有微生物所必不可少的氮源、氮源、碳酸盐、生长素及其水份等。此外,培养液还应具备适合的pH值、一定的缓存工作能力、一定的氧化还原反应电位差及适合的血浆渗透压。以便做到特殊规定的科学研究,需要开展培养液配置和杀菌,那麼微生物菌种培养液该怎样配置与杀菌呢?
方法:
1、仪器设备灭菌:化学灭菌、辐射灭菌、干热灭菌、湿热灭菌
化学灭菌主要针对器皿、双手和实验室、无菌室的环境灭菌,使用甲醛、高锰酸钾等灭菌剂;
用辐射灭菌于室内空气及器皿表面灭菌,如常用的有紫外线、X射线和γ射线。
干热灭菌一般常用灼烧和电热箱加热,140-180℃ 1-2小时。适于对玻璃及金属用具及沙土管灭菌。
湿热灭菌指的是水煮常压灭菌:100℃、或饱和蒸汽灭菌:一般121℃,30分钟。适合培养基或发酵的设备灭菌
 
2、培养液或/发酵液:过滤除菌
过滤除菌原理是利用微生物不能透过滤膜除菌。方法是使用0.01~0.45 mm孔径滤膜,利用负压过滤或压缩空气用于酶溶液及其他不耐热化合物溶液除菌


过滤除菌常用的负压抽滤装置

500ml以下容量培养液除菌的话,可以采用R300-LF50-500,可以把500ml的血清瓶放入抽滤瓶里,过滤后的液体直径引入血清瓶,然后取出保存。配置的漏斗为500ml容量,可以一次性过滤完500ml(含)以下容量的培养基。配置的漏斗、抽滤瓶、血清瓶均可蒸汽高压灭菌。


大容量的培养基除菌,采用L200-5CPES,配置的围篱笆式一体真空泵,可以放置3000ml的血清瓶,不会产生因外界产生的磕碰等原因,导致抽滤瓶倾斜摔倒,至培养液流掉浪费。而且可以根据需求更换小于3000ml的GL45血清瓶作为抽滤瓶,灵活方便。配置的漏斗及血清瓶、GL45转接器、矽胶管均可蒸汽121°灭菌,确保设备的无菌。